微滴式数字PCR系统是什么？

微滴式数字PCR系统是一种基于PCR反应的单分子绝 对定量技术。原理是将含有核酸模板的标准PCR反应体系,平均分配为数以万计的微液滴,尽可能使得每个反应中含有一个模板,然后进行单分子模板的PCR反应。这样含有模板的液滴在扩增后就会具有较强的荧光,依次测量每一个微液滴读取荧光信号,再针对荧光信号的有无计数就可以实现绝 对定量。

微滴式数字PCR系统通过对样本的微滴化处理，大大提升了测量的灵敏度和准确性,只需要非常少的模板量就能够进行检测。此外, dPCR还弥补了qPCR系统需要严格依赖标准曲线的问题,测量绝 对定量,对逐个微液滴的统计分析结果可靠。

在实际应用中, 微滴式数字PCR系统还具备防污染和全集成的优点。PCR反应被严格局限于水相微液滴中,能够有效避免接触污染，也易于集成和自动化。

数字PCR的检测灵敏度较荧光定量PCR高1 -2个数量级,更适合检测微量痕量病毒,此次冠状病毒感染也出现了早期症状不明显,但是核酸检测呈阳性的的“潜在感染者”和"隐藏患者”。借用一个例子, qPCR检测突变像是在大海里捞一个会发光的针 ,周围都是海水,很难看到针的光在哪,而dPCR就像把海水盛到好多个碗里面，瞧一眼很容易就知道哪个碗在发光了,而且,系统还会数出来到底有多少个碗里是发光的,多少个碗里是没发光的,这样一比,就很容易的知道有多少数量的突变,就能做到绝 对定量了。一句话概括微滴式数字PCR :“数数"。