微滴式数字PCR系统使用说明

微滴式数字PCR系统在传统的PCR扩增前对样品进行微滴化处理，即将含有核酸分子的反应体系分成成千上万个纳升级的微滴，其中每个微滴或不含待检核酸靶分子，或者含有一个至数个待检核酸靶分子。经PCR扩增后，逐个对每个微滴进行检测，有荧光信号的微滴判读为1，没有荧光信号的微滴判读为0，根据泊松分布原理及阳性微滴的个数与比例即可得出靶分子的起始拷贝数或浓度。

下面我们一起看看微滴式数字PCR系统的使用说明吧。

微滴式数字PCR系统使用说明：

1.将所有试剂融化至室温，并涡旋混匀，避免由于贮存在-20°C而引起的试剂不均一，涡旋后短暂离心，将液体收集在试管底部。

2.根据表中要求准备试剂,配置除了样品的其余部分,平均地分在EP管中，最 后加入样品，混匀。

3.配好样品后，将20ul样品转移到三排孔的样品发生器中的样品孔中，油孔中加入70ul 微滴生成油，然后将发生器置入微滴生成仪器，运行,等待仪器完全停止后方可拿出样品。

4.油包水的微滴制备完成后将40ul液体转移到96孔板，用封口膜封好，置入PCR仪，进行PCR反应。

5.打开QuantaSoft软件,点击“Setup”设定 实验布局及样品信息。PCR反应完成后将96孔板上的封口膜去除，覆上锡箔纸，置入QX200 Droplet Reader 读取微滴数据，点击“Run”运行。

6.读取数据结束后，点击软件“Analyze” 分析结果。

7.结束实验后将96孔板从Droplet Reader 中取出，关闭仪器电源、关闭电脑。