微滴式数字PCR系统不依赖Ct值或内参基因,即可确定低至单拷贝的待检靶分子的绝 对数目。微滴技术让数字PCR更低成本,且更实用。
微滴式数字PCR系统适合于拷贝数变异研究、复杂来源样品中含量极低核酸分子的检测、NGS数据验证、NGS测序文库的鉴定、miRNA等差异微小的基因表达研究。
下面给大家分享微滴式数字PCR系统的注意事项,我们一起来看看吧。
微滴式数字PCR系统的注意事项,如下:
1.扩增子长度应在80-250pb。
2.完整的人源基因组DNA在20ul反应体系中浓度应小于66ng, 如果想使用更大浓度则需要用限制性内切酶消化DNA。
3.打开电脑中的QuantaSoft 软件,如果QX200 Droplet Reader仪器已开启且连接正常,会在软件界面的右上方出现6 Instrument Routines” 的面板,其“Prime” 和“FlushSystem”两项用于日常维护(其他不常用),“Pr ime”用于更换Reader 0il或者一周以上未用仪器再次使用前用Reader 0il重新填充管路,“Flush System” 建议在每天第 一次实验前运行清洗下管路和取样针。注:仅当仪器中放入Plate Holder 时以上命令才能运行。
4. 编辑或者改动孔信息完成后,注意Wel Editor 中的“Apply”方框内是否都打上J,只有打上V的点击下方“Apply”按钮才会有效,完成后点击“0K”保存改动并退出Well Editor。
以上就是微滴式数字PCR系统的使用注意事项,希望对大家有所帮助。
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