微滴式数字PCR系统在传统的PCR扩增前对样品进行微滴化处理,即将含有核酸分子的反应体系分成成千上万个纳升级的微滴,其中每个微滴或不含待检核酸靶分子,或者含有一个至数个待检核酸靶分子。经PCR扩增后,逐个对每个微滴进行检测,有荧光信号的微滴判读为1,没有荧光信号的微滴判读为0,根据泊松分布原理及阳性微滴的个数与比例即可得出靶分子的起始拷贝数或浓度。
微滴式数字PCR系统是一种用于基础医学、临床医学、预防医学与公共卫生学领域的分析仪器,于2016年2月16日启用。
微滴式数字PCR系统与传统PCR相比所具有的优势
不依赖Ct值或内参基因,即可确定低至单拷贝的待检靶分子的绝 对数目。微滴技术让数字PCR更低成本,且更实用。
微滴式数字PCR系统大致的应用方向
适合于拷贝数变异研究、复杂来源样品中含量极低核酸分子的检测、NGS数据验证、NGS测序文库的鉴定、miRNA等差异微小的基因表达研究。
能够对DNA进行直接绝 对定量; 每个反应体系生成的微滴数≥20000个; 至少50个PCR反应后微滴仍能够保持稳定而不互相融合; 至少支持双重荧光检测; 自动化产生微滴,45分钟完成≥96个ddPCR反应的微滴制备; 精确度:≥90%。
用于稀有变异的检测;基因表达分析;DNA绝 对定量;基因突变位点SNP检测。
在线留言